體視熒光顯微鏡使用方法與注意事項

1、使用方法：

(1)將材料片放在載物台上。

(2)開啟放大鏡熒光顯微鏡穩壓器，然後按下啟動組點燃紫外燈15min內不得關閉，關閉後3min內不得再啟動。

(3)將激發濾光片轉至v，分色片調到v，選用495或475nm阻擋濾光片。

(4)選用uvFL40、uvFL100熒光接物鏡鏡檢。

(5)在玻片上加無熒光油，先用40x，再用100x調焦鏡檢，呈顯微鏡現熒光。

(7)因熒光物質受紫外光照射時隨時間的增長熒光逐漸變弱，因此鏡檢時應經常變換視野。

(8)亦可用uvFL10或uvFL20低倍鏡鏡檢材料（用低倍鏡時不望遠鏡加無熒光油）。

2、熒光圖像的記錄方法：

熒光顯微鏡所看到的熒光圖像，一是具有形態學特征，二是具有熒光的顏色和亮度，在判斷結果時，必須將二者結合起來綜合判斷。結果記天文望遠鏡錄根據主觀指標，即金相顯微鏡憑工作者目力觀察。作為一般定性觀察，基本上可靠的。隨著技術科學的發展，在不同程度上采用客觀指標記錄判斷結果，如用細胞分光光度計、圖像分析儀等儀器。但這些儀器記錄的結果，也必須結合主觀的判斷。

熒光顯微鏡攝影技術對於記錄熒光圖像十分必要，由於熒光很易褪色減弱，要即時攝影記錄結果。方法與普通顯微攝影技術基本相同。只是需要采用高速感光膠片如ASA200以上或24o以上。因紫外光對熒光猝滅作用大，如fitC的標記物，在紫外光下照射30s，熒光亮度降低50%。所以，曝光速度太慢，就不能將熒光圖像拍攝下來。一般研究型熒光顯微鏡都有半自動或全自動顯微攝影系統裝置。


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